Guillen Luna, Glenda Mazzally and Hernández Guzmán, Elizabeth Dinora, Elizabeth Dinora (2016) Determinación de la toxicidad sub crónica del extracto n- hexanico de las hojas de Calea urticifolia (Juanislama) en ratones NIH. Bachelor thesis, Universidad de El Salvador.

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Abstract

El objetivo fue la determinación de la toxicidad a 90 días del extracto n-hexánico de las hojas de Calea urticifolia en ratones de la cepa NIH y la cuantificación de sesquiterpenlactonas totales presentes en los extractos durante el periodo comprendido de enero a marzo de 2014. La investigación se desarrolló en dos etapas, el estudio fitoquímico que se inició con la identificación de la especie vegetal C. urticifolia por un experto botánico, seguida de la recolección de las hojas una vez por mes durante tres meses (enero a marzo). Las hojas se secaron y se extrajeron con n-hexano por método Soxhlet; seguida por la eliminación del solvente que produjo el extracto seco. Se procedió a la identificación de sesquiterpenlactonas, por medio de cromatografía en capa fina, utilizando el revelador de Baljet, y por espectroscopia Ultravioleta, comparando con el marcador analítico Juanislamina, que es la sesquiterpenlactona mayoritaria en este extracto. En ambas técnicas los resultados fueron positivos para los metabolitos secundarios activos (sesquiterpenlactonas). Se procedió a la cuantificación de sesquiterpenlactonas totales, utilizando el método de espectroscopia visible midiendo la absorbancia de las muestras por quintuplicado.Se calculó el porcentaje de sesquiterpenlactonas totales en el extracto seco y el porcentaje de sesquiterpenlactonas totales en material vegetal seco. La segunda etapa la evaluación de la toxicidad del extracto n-hexánico de hojas de C. urticifolia en ratones de la cepa NIH, durante un periodo de 90 días. Los ratones fueron separados en 6 grupos de 5 ratones, dividiéndolos en machos y hembras, distribuidos: dos grupos control que se les administró agua destilada como blanco, dos centinela y dos tratamiento, tratados con el extracto n-hexánico. Se pesaron semanalmente el peso como parámetro de toxicidad, se realizaron las soluciones del extracto para administrarles durante los tres meses, y se evaluó el comportamiento con observaciones clínicas diarias por 90 días. Se procedió a la toma de muestras de sangre para pruebas hematológicas y bioquímicas y luego la necropsias de los grupos tratamiento y control, dejando por un mes más a los grupos centinela con administración de agua destilada para observar si los daños producidos fueron reversibles con el tiempo. Se les realizaron las mismas pruebas de sangre y posteriormente las necropsias para el análisis macroscópico de órganos. Los órganos se preservaron en formalina al 10% y fueron procesados por medio de la técnica histopatológica clásica para bloques parafinados, los cuales se conservan en almacenamiento mientras un patólogo pueda realizar los cortes y realice el respectivo examen histopatologico. El análisis estadístico de los datos obtenidos en la cuantificación se les realizó la desviación típica estándar con un intervalo de confianza de 95% para concluir el mes donde se produce más cantidad de sesquiterpenlactonas; mientras que los datos de toxicidad, se evaluaron con el software SPSS para Windows y para contrastar la normalidad de estos se utilizó el Test de Shapiro–Wilk, y así demostrar mediante los resultados de diferencias significativas, si el extracto n-hexánico causaba daños tóxicos al organismo y si estos fueron reversibles con el tiempo, información que le será útil al patólogo en la realización del examen histopatologico. Los resultados obtenidos demuestran que el extracto n-hexánico de C. urticifolia administrado a ratones NIH produce alteraciones en los datos clínicos de química sanguínea y hematológica, se observa una caída significativa del peso corporal en los animales de experimentación, tanto en los grupos macho y hembra, verificando que en los grupos centinela existe recuperación del peso al finalizar el estudio, que es mayor en el grupo de ratones macho, manifestando mayor susceptibilidad de las hembras a los efectos dañinos de esta especie vegetal. Y evidenciando la presencia de un moderado daño tóxico a nivel gastrointestinal.

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